【摘 要】
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背景与目的：目的 ZNF139是锌指蛋白家族成员,属于转录调控因子.锌指蛋白家族中许多成员与肿瘤的发生、发展、侵袭转移、凋亡关系密切.我们前期研究发现,ZNF139在胃癌细胞中表达增高,与胃癌细胞的分化程度有关.但ZNF139在胃癌细胞中的功能还不明确.本研究应用小干扰RNA转染技术敲低过表达ZNF139胃癌细胞株中ZNF139的表达,观察转染后胃癌细胞活性及凋亡情况的变化；进一步检测凋亡相关基因
【机 构】
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河北医科大学第四医院外三科,石家庄市桥东区健康路12号,050011
【出 处】
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第9届全国胃癌学术会议暨第二届阳光长城肿瘤学术会议
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背景与目的：目的 ZNF139是锌指蛋白家族成员,属于转录调控因子.锌指蛋白家族中许多成员与肿瘤的发生、发展、侵袭转移、凋亡关系密切.我们前期研究发现,ZNF139在胃癌细胞中表达增高,与胃癌细胞的分化程度有关.但ZNF139在胃癌细胞中的功能还不明确.本研究应用小干扰RNA转染技术敲低过表达ZNF139胃癌细胞株中ZNF139的表达,观察转染后胃癌细胞活性及凋亡情况的变化；进一步检测凋亡相关基因在转染前后表达的变化.从而探讨ZNF139在胃癌细胞凋亡中发挥的作用及机制.方法：荧光定量PCR和蛋白印迹技术检测胃癌组织、癌旁正常组织中ZNF139的表达,同时检测胃癌细胞株MKN28、SGC7901、BGC823和胃上皮细胞株GES-1中ZNF139表达；合成针对ZNF139的siRNA并转染胃癌细胞株BGC823,蛋白印迹技术检测siRNA抑制效率并确定最佳转染浓度和时间；MTT法检测转染前后胃癌细胞活性的变化；流式细胞术检测ZNF139-siRNA转染BGC823胃癌细胞后对细胞周期和凋亡率的影响；检测转染前后Survivin、x-IAP、caspase-3、Fas、p53、Bcl-2、Bax基因表达的变化.结果：①ZNF139在胃腺癌组织中的表达明显高于在癌旁组织中的表达；ZNF139在GES-1中表达极弱,在各胃癌细胞株中均有表达,在BGC823中表达强度最高.②Western blot显示,ZNF139-siRNA转染胃癌细胞株BGC823后细胞中ZNF139表达受到显著抑制,抑制率达90％,序列为ZNF139-siRNA-2的siRNA抑制效率最高.③MTT结果显示,ZNF139-siRNA-2在80nmol/L,48h时对细胞的抑制效率最明显.④流式细胞术显示,转染后胃癌细胞G0/G1期比例明显升高,而G2、M期细胞的比例明显降低；转染后胃癌细胞的凋亡率明显上升.⑤ZNF 139-siRNA转染胃癌细胞株BGC823经48h后,荧光定量PCR及Western blot显示Survivin、x-IAP、Bcl-2表达明显降低,而caspase-3、Bax表达均显著增加；Fas、p53 mRNA及蛋白表达变化不明显.结论：ZNF139在胃癌细胞中表达增强,敲低ZNF139表达可有效降低胃癌细胞的凋亡抵抗能力,此过程可能是ZNF139通过调节凋亡抑制蛋白家族及线粒体凋亡途径中一些基因的表达而发挥作用的.
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