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研究目的:探索miRNA-324-3p与α-MSH对羊驼黑色素细胞内黑色素生成的调控作用。材料与方法:本研究以体外培养的羊驼黑色素细胞为研究对象,设立转染组(转染miRNA-324-3p)、添加组(添加一定浓度α-MSH)、转染添加组(转染miRNA-324-3p,同时添加α-MSH),并设立对照组。应用qRT-PCR、western blot检测各组黑色素细胞内相关基因(MC1R、Mitf、Tyr、Tyrp2)在m RNA水平和蛋白水平的表达量,并用酶标仪检测各组黑色素的产量。研究结果:(1)q RT-PCR结果为:转染组、添加组和转染添加组中,MC1R mRNA表达量分别是对照组的0.42倍、2.81倍、1.43倍,差异极显著(P <0.01);Mitf m RNA表达量分别是对照组的0.70倍、1.86倍、1.40倍,差异极显著(P <0.01);Tyr m RNA表达量分别是对照组的0.27倍、1.50倍、0.90倍,差异极显著(P <0.01);Tyrp2 mRNA表达量分别是对照组的0.65倍、3.33倍、1.70倍,差异极显著(P <0.01)。转染添加组中MC1R、Mitf、Tyr、Tyrp2m RNA表达量分别是单纯添加α-MSH组的0.51倍、0.75倍、0.60倍、0.51倍。(2)Western blot检测结果为:转染组、添加组和转染添加组中,MC1R蛋白表达量分别是对照组的0.84倍、1.89倍、1.11倍,差异极显著(P <0.01);Mitf蛋白表达量分别是对照组的0.77倍、1.25倍、1.21倍,差异显著(P <0.05);Tyr蛋白表达量分别是对照组的0.90倍、1.35倍、1.24倍,差异极显著(P <0.01);Tyrp2蛋白表达量分别是对照组的0.92倍、1.12倍、1.07倍,且差异极显著(P<0.01)。转染添加组中MC1R、Mitf、Tyr、Tyrp2蛋白表达量分别是单纯添加α-MSH组的0.59倍、0.96倍、0.92倍、0.95倍。(3)酶标仪测定结果为:转染组、添加组和转染添加组黑色素的产量分别是对照组的0.65倍、1.93倍、1.20倍,差异极显著(P<0.01)。转染添加组的黑色素产量是单纯添加α-MSH组的0.62倍。结论与讨论:过表达mi RNA-324-3p可以抑制α-MSH对MC1R、Mitf、Tyr、Tyrp2基因的表达水平,从而抑制α-MSH对黑色素细胞产生黑色素的促进作用。