Fgf8在肌肉中激活抑制舌肌分化,引起舌发育畸形

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目的:舌的整个发育过程受到肌源性调节因子(MRFs)的调控,其受FGF等信号传导途径控制。Myf5是最早表达的一种肌源性调节因子,诱导肌前体细胞分化为成肌细胞。本研究利用Myf5-cre在肌源性祖细胞中激活Fgf8,探讨Fgf8对舌发育过程中肌原性分化的影响。材料与方法:将Myf5-cre小鼠与Rosa26R-Fgf8小鼠交配,获得Myf5-cre;Rosa26R-Fgf8(下简称RF8)小鼠,即在肌源性细胞中特异性激活Fgf8的小鼠模型,其余同窝小鼠作为对照(WT)。采用Masson染色法观察舌组织形态,利用BrdU检测细胞增殖情况。免疫组织化学检测Myosin在舌肌中的表达变化,以观察舌肌纤维的差异。体外培养C2C12细胞并加入Fgf8重组蛋白处理,进行肌球蛋白免疫荧光测定。结果:Masson和Myosin染色结果显示,E13.5 RF8小鼠舌的形态和肌纤维排列与WT小鼠之间没有明显差异。但E14.5和E15.5 RF8小鼠舌形态异常,舌内肌肌纤维变少变短且排列紊乱,舌直肌及横肌最为明显。颏舌肌形态被破坏,肌束边界不清楚,肌束之间距离增大。E14.5 RF8小鼠颏舌肌中BrdU阳性细胞的数量显着高于WT小鼠。体外培养C2C12细胞4天,经Fgf8重组蛋白处理,肌球蛋白免疫荧光测定结果发现表达肌球蛋白的肌管数量明显减少,多核肌管短而薄。结论:在肌源性祖细胞中过表达Fgf8可促进细胞增殖并抑制舌发育过程中的肌原性分化。
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