球孢白僵菌孢壁抗菌肽的生物学功能研究

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竞争是自然选择的基本驱动力之一。虫生真菌球孢白僵菌广泛存活于土壤和植物叶面/根系等环境,与其它真菌(尤其是植物病原真菌)展开激烈的生存竞争。课题组研究发现,球孢白僵菌抗菌肽BbAFP在成熟分生孢子中特异表达,在球孢白僵菌拮抗其它真菌时发挥重要作用。荧光定位观察和ELISA检测结果表明,BbAFP定位于孢子细胞壁,在孢子萌发过程会释放到液体培养基中,抑制环境中其它真菌的生长。球孢白僵菌与植物病原真菌的共培养实验发现,野生型菌株及BbAFP超量表达菌株对共培真菌的生长有明显的抑制作用,而敲除BbAFP则显著降低这种抑制作用。酵母异源表达的BbAFP对多种植物病原真菌的生长具有明显的抑菌效果,如链格孢属、尖孢镰刀菌、大丽轮枝菌和稻瘟病菌等,但对大肠杆菌或酿酒酵母没有影响。抑菌机理分析发现,BbAFP能与真菌细胞壁的主要成分几丁质相结合,并引起真菌细胞膜的破裂。但将BbAFP第50位苯丙氨酸突变成丙氨酸后,其几丁质结合能力及抑菌活性都显著降低。除此之外,将BbAFP导入番茄中表达能够显著提高植株对病原菌的抗病能力。上述结果表明胞壁抗菌肽BbAFP在球孢白僵菌拮抗环境真菌过程中具有重要作用,该抗菌肽编码基因可应用于植物抗病基因工程。
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