【摘 要】
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目的:构建辐射诱导表达载体pEgr-hPTEN并研究其体外稳定转染联合X-射线照射对恶性胶质瘤细胞SHG-44增殖、细胞周期进程及诱导细胞凋亡的作用.方法 采用分子克隆技术构建pEgr-hPTEN,体外采用脂质体包裹法转染内源性PTEN基因突变的胶质瘤细胞SHG-44,经G418筛选,获得稳定转染细胞株SHG-44-sPTEN,体外接受0-Gy-10Gy X射线照射,提取胞浆蛋白,经Western
【机 构】
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吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物重点实验室(长春)
【出 处】
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2004全国医用辐射防护与安全学术研讨会
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目的:构建辐射诱导表达载体pEgr-hPTEN并研究其体外稳定转染联合X-射线照射对恶性胶质瘤细胞SHG-44增殖、细胞周期进程及诱导细胞凋亡的作用.方法 采用分子克隆技术构建pEgr-hPTEN,体外采用脂质体包裹法转染内源性PTEN基因突变的胶质瘤细胞SHG-44,经G418筛选,获得稳定转染细胞株SHG-44-sPTEN,体外接受0-Gy-10Gy X射线照射,提取胞浆蛋白,经Western blot检测其表达;稳定转染细胞和未转染对照细胞接种于6孔培养板,每种细胞接种4组,每组3复孔,接受不同剂量0-10Gy X-射线照射后每两日每种细胞取1组进行计数,绘制细胞生长曲线;采用Annexin V-FITC细胞凋亡试剂盒检测肿瘤细胞早期凋亡;应用流式细胞仪检测细胞周期过程.
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