目的:探讨新型小檗碱衍生物PW1通过宿主途径发挥抗菌作用及其机制,为新型抗菌药物的研究提供实验依据,为解决临床抗药性问题提供新的思路。方法:构建转化有BL21-EGFP质粒的E.Coli工程菌,感染小鼠BMDM细胞后加入PW1,荧光显微镜观察细胞内标记菌株的清除情况;用SYTO9标记MRSA菌后感染小鼠BMDM,PW1处理后观察BMDM细胞内MRSA菌清除情况;Western blot法检测细胞自噬相关蛋白p62、Lamp1、Cathpsin B、D等的变化;核质分离方法检测TFEB蛋白的入核情况;LysoTracker Red染色,荧光显微镜检测细胞内溶酶体膜和酸性水解酶活性变化;RT-PCR方法检测溶酶体相关基因表达变化。结果:荧光显微镜和菌落计数结果表明,PWl可使感染至BMDM细胞中的E.Coli和MRSA菌明显减少,表明PWl可通过宿主途径发挥杀菌作用。进一步的机制研究表明,PWl可使BMDM细胞中TFEB入核明显增加,从而激活TFEB的转录活性,促进溶酶体的生物合成,表现在PWl作用后BMDM细胞中LysoTracker Red染色增强,Lamp1表达增加,p62减少。此外PW1可促进溶酶体相关基因的表达,并增强溶酶体内水解酶的活性。以上结果表明PW1可通过宿主TFEB依赖性溶酶体途径发挥杀菌作用。结论:溶酶体途径在宿主细胞抗菌作用中发挥重要作用。小檗碱新衍生物PW1可通过TFEB依赖性溶酶体途径发挥杀菌作用。本研究为新型抗菌药物的研究提供了新的思路。