血清淀粉样蛋白A(SAA)是一种主要的急性时相反应蛋白,由肝细胞产生并释放至血液循环。目前,细菌、病毒感染、冠心病、动脉粥样硬化、肿瘤、急性移植排斥反应等疾病中均检测到血清SAA升高。作为一个新的检测指标,SAA正受到人们越来越多的关注。血清淀粉样蛋白A家族由SAAI、SAA2、SAA3及SAA4四个家族成员构成。SAAI作为家族最主要组成成分,是SAA家族中表达最广泛、活性最强、反应最敏感的亚型。虽然在正常情况下SAAI表达水平较低,但在感染急性期状态下其在血清中的浓度在极短时间内升高100-1000倍。因此,本实验室通过利用毕赤酵母表达系统来表达高活性的SAA1,根据毕赤酵母菌的偏好性来设计并合成SAA1的基因片段,构建表达载体pPICZαA-SAA1,通过电转化将表达载体pPICZαA-SAA1转入毕赤酵母菌X-33中,然后进行重组SAA1蛋白的表达,利用SDS-PAGE电泳鉴定,Ni柱纯化、透析、浓缩制备出高纯度高表达量的SAA1蛋白。实验结果表明:表达条件在28℃、72h、终浓度为0.5%的甲醇,获得了纯度为96%、分子量为14kD的SAA1蛋白。同时,利用胶体金标记的方法,通过双抗夹心法将一种单克隆抗体与胶体金进行偶联形成标记探针,另一种单克隆抗体用于硝酸纤维素膜的包被,建立SAA1胶体金免疫层析检测方法,线性范围180 ng/mL~10μg/ml,总精密度CV<5%。为临床体外SAA1快速检测及诊断提供技术基础。