本试验旨在研究添加不同浓度的亮氨酸对乳腺上皮细胞体外增殖及κ-酪蛋白合成相关基因表达的影响。选用中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞进行体外培养,以不含有亮氨酸的培养基(0.00mM/L)为对照组(0′),试验组培养基分别添加0.1125 mM/L(0.25′组),0.225 mM/L(0.5′组),0.45 mM/L(1′组),0.9 mM/L(2′组),1.8mM/L(4′组),3.6 mM/L(8′组),7.2 mM/L(16′组),14.4 mM/L(32′组)的亮氨酸。结果表明:亮氨酸能够促进乳腺上皮细胞的增殖。24h和48h时,0.25′组与对照组相比差异不显著(P>0.05),其余各组与对照组差异显著(P<0.05)。72h时,各组均与对照组相比差异显著(P<0.05),其中2′组的促增殖作用最强。亮氨酸能够促进雷帕霉素靶蛋白(mTOR),核糖体蛋白S6激酶(S6K1)、蛋白质酪氨酸激酶2(JAK2)、转录激活因子5(STAT5)和κ-酪蛋白(CSN3)基因的表达,抑制4EBP1基因的表达。其中2′组对mTOR,S6K1,JAK2,STAT5和CSN3基因的上调表达最强,而对4EBP1基因的下调表达最强。总之,添加亮氨酸能够促进奶牛乳腺上皮细胞增殖和κ-酪蛋白合成相关基因表达,亮氨酸添加量为0.9 mM/L时,其促进作用均达到最大。