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目的：1、寻找简单可靠的方法对人骨髓间充质干细胞进行体外分离培养与鉴定,并研究其生物学特性和诱导分化条件,为骨组织工程研究提供大量种子细胞；2、评价新型可注射可降解磷酸钙骨水泥的细胞相容性,为体外构建和体内实验提供理论依据；3、探讨新型可注射磷酸钙骨水泥与骨髓间充质干细胞共培养的可行性,为组织工程化骨的构建提供科学依据.方法：1、取少量健康人骨髓采用Pecoll分离液进行密度梯度离心获得单个核细胞,用含10％FBS的L-DMEM经贴壁培养法分离纯化、扩增获得大量hBMSCs,观察细胞形态、生长特性并经流式细胞仪鉴定；分别以成骨诱导液和BMP-2诱导细胞成骨；2、采用浸提法制备CPC浸提液,加入到人骨髓间充质干细胞的培养体系中,MTT法测定细胞相对增殖率,进行细胞毒性反应分级；流式细胞仪检测CPC浸提液培养的hBMSCs的细胞周期；将肝素抗凝的新鲜健康人血用生理盐水稀释成2％的人血悬液,在离心管中分别加入CPC生理盐水浸提液(浸提液原液组、50％原液组)、生理盐水(阴性对照组)和双蒸水(阳性对照组),37℃水浴60 min,用分光光度计测定吸光度值,计算红细胞溶解率；将浸提液5ml缓缓注入新西兰白兔的耳静脉,记录其体温值；3、将新型磷酸钙骨水泥在不同凝结时间分别加入到BMSC浓度为1×107/L的6孔培养板中,逐日观察材料边缘细胞贴壁生长情况,培养一周后扫描电镜观察；取第三代BMSC,将密度调至1×107/L加入到12孔培养板,注入糊状磷酸钙骨水泥(成团期),分别于培养1天、3天、5天、1周终止培养进行扫描电镜观察.结果：1、经密度梯度离心贴壁培养法可较易扩增、获得大量高纯度的BMSC,其细胞形态、分化特性和表型均符合干细胞特点,并能在特定培养条件下(OS或BMP-2)向成骨细胞分化.2、新型磷酸钙骨水泥的细胞毒性反应为0～Ⅰ级,基本无毒性；对人血的溶血率＜5％,即无体外溶血作用；白兔体温波动＜1°C,无明显致热作用.3、光镜下见细胞在大部分组的CPC材料边缘生长良好,未见细胞变形、坏死；扫描电镜观察见大量细胞紧贴材料生长,细胞生长良好,细胞呈不规则的多角形、近圆形,在骨水泥表面与其他细胞相连融合成片.结论：1、BMSCs取材方便、对机体创伤小,分离扩增容易,利用密度梯度离心+贴壁培养法可获得大量高纯度的BMSCs；细胞增殖能力好,定向诱导分化技术成熟,成骨诱导简便易掌握且成骨性能良好,是适合骨组织工程研究的理想种子细胞.2、新型可注射性磷酸钙骨水泥具有良好的生物相容性,符合体内植入材料的细胞毒性要求,不会对机体造成明显的不良影响,可以向临床应用过渡.3、骨髓间充质干细胞能够在常规培养体系中与新型可注射可降解磷酸钙骨水泥共培养,可进行下一步的动物体内组织工程化骨构建实验.