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目的:研究胡椒碱(piperine,pip)对人骨肉瘤细胞系HOS和U2OS细胞增殖与转移的影响,结合相关检测方法,探讨其作用机制,为胡椒碱的临床应用提供实验依据。方法:采用细胞增殖抑制实验(MTS)观察pip对骨肉瘤细胞HOS和U2OS的生长抑制;流式细胞术、克隆形成实验、明胶酶谱实验、侵袭实验与蛋白免疫印记法来观察经pip作用后,HOS和U2OS细胞的周期变化,周期相关蛋白的改变,以及侵袭相关蛋白活性与表达的改变。结果:Pip可显著抑制骨肉瘤细胞的增殖,并呈时间与浓度依赖性,但对正常的人成骨细胞hFOB表现了较弱的抑制作用;经pip作用72h后通过改变周期相关蛋白的表达使得细胞周期阻滞于G2/M期,pip下调了cyclinB1的表达,同时增加了磷酸化的CDK1和Chk2的表达,与对照组相比,有显著性差异(p<0.05)。明胶酶谱与western blotting结果表明:pip可抑制骨肉瘤细胞MMP-2/-9活性的表达,同时降低了MMP-2/-9蛋白的表达,与之相关的TIMP-1/-2蛋白表达增加,与对照组相比,有显著性差异(p<0.05)。HOS与U2OS细胞分别经pip作用48h、72h后,上调了p-JNK、p-38的表达,同时降低了p-Akt的表达。结论:胡椒碱可明显抑制HOS和U2OS细胞的增殖,并呈时间与浓度依赖性;胡椒碱通过改变周期相关蛋白的表达使得HOS和U2OS细胞阻滞于G2/M期;胡椒碱可以降低MMP-2/-9的活性与蛋白表达,同时改变了MAPK与Akt信号通路相关蛋白的表达。