【摘 要】
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目的：观察胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对坐骨神经慢性缩窄性损伤(GCI)小鼠的镇痛作用,探讨其作用的跨膜信息传递机制.方法：1.雄性昆明小鼠40只,随机分为5组(n=8)：sham组、术后1d、3d、7d和14d 5个亚组.于术前1天及术后第1、3、7、14d测定热缩足反射潜伏期(PWL)后处死,取脊髓背角,采用Western blot方法检测E-cadherin表达情况；采用免疫共沉淀检
【机 构】
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江苏省苏北人民医院;扬州大学临床医学院 江苏省麻醉学重点实验室
【出 处】
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中国长江医学论坛——2015麻醉学年会暨江苏省第二十次麻醉学学术会议
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目的：观察胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对坐骨神经慢性缩窄性损伤(GCI)小鼠的镇痛作用,探讨其作用的跨膜信息传递机制.方法：1.雄性昆明小鼠40只,随机分为5组(n=8)：sham组、术后1d、3d、7d和14d 5个亚组.于术前1天及术后第1、3、7、14d测定热缩足反射潜伏期(PWL)后处死,取脊髓背角,采用Western blot方法检测E-cadherin表达情况；采用免疫共沉淀检测E-cadherin胞内段偶联型p 120ctn(E-cadherin-p120ctn)的表达情况.2.雄性昆明小鼠32只,随机分为4组(n=8)：sham组、CCI (14d)组、PBS/CCI(1-14d)组、GDNF/CCI(1-14d)组.同样在上述时间点测定PWL,采用Western blot和免疫荧光染色方法检测鞘内注射GDNF对背角E-cadherin及E-cadherin-p 120ctn的表达影响.3.雄性昆明小鼠32只,随机分为4组(n=8)：sham组、PBS/CCI(1-14d)组、GDNF+E-cadherin封闭抗体/CCI(1-14d)组、 GDNF+IgG/CCI(1-14d)组.同样在上述时间点测定PWL,采用免疫共沉淀方法检测E-cadherin-p120ctn的表达情况.结果 1.与sham组相比,CCI小鼠PWL在术后第7天和14天明显降低且背角E-cadherin表达降低(P＜0.01)；免疫共沉淀结果显示：E-cadherin-p120ctn的表达也降低.2.与CCI (14d)和PBS/CCI(1-14d)组相比,GDNF/CCI(1-14d)组小鼠PWL明显升高并且GDNF能逆转E-cadherin的减少,促使胞内p120ctn往E-cadherin胞内段募集,使E-cadherin-p 120ctn表达恢复至正常水平.3.与GDNF+IgG/CCI(1-14d)组相比,GDNF+E-cadherin封闭抗体/CCI(1-14d)组小鼠PWL明显降低并且E-cadherin-p 120ctn的表达也减少(P＜0.01).结论 E-cadherin/p 120ctn信号系统参与了GDNF的镇痛作用,阻断这一信号系统明显降低GDNF的镇痛作用.
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