中药提取物对肺炎支原体感染A549细胞干预作用的研究

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目的:研究虎杖、半枝莲、蝉蜕及其药对和小复方的提取物对肺炎支原体(MP)的体外抑制作用以及对MP感染A549细胞重要炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、核转录因子(NF-κB)的调节作用。方法:(1)将虎杖、半枝莲、蝉衣单味药,并以3:5:2的比例混合成小复方,各自用水提法和醇提法提取;(2)将不同中药提取物稀释成2组浓度进行药敏试验,再加入MP菌液,测定每组的最小抑菌浓度(MIC);(3)检测不同浓度的中药提取物对A549细胞的毒性作用,计算半数抑制浓度(IC50);(4)挑选抑菌效果较好的中药组,检测四个时间点(12h、24h、36h、48h)不同浓度的中药提取物对MP感染后的A549细胞的影响;(5)观察不同浓度的中药提取物对肺炎支原体感染A549细胞后炎症因子IL-6、TNF-α、NF-κB的调节作用。结果:(1)虎杖、半枝莲、蝉蜕的水提物和醇提物对MP均有一定的体外抑制其生长的作用,药敏试验结果显示:小复方醇提物效果最佳,药对醇提物效果优于药对水提物;单味药醇提物优于单味药水提物,单味药水提物优于部分药对水提物,蝉蜕水提物和醇提物在三味药中最差。(2)虎杖、半枝莲、蝉蜕的水提物和醇提物对A549细胞活力有影响,且随着浓度的增高而增加。(3)与正常细胞组相比,MP感染后的A549细胞活力随着时间的推移逐渐下降;加用各组中药提取物干预后,也随着时间的推移和药物浓度的增加,保护作用越来越明显。(4)与正常组细胞相比,被MP感染的A549细胞的炎症因子TNF-α、IL-6、NF-κB均出现明显升高,但加入各浓度中药提取物干预后,炎症因子水平均有明显下降,且呈量效关系;药对的调节作用优于单味药,小复方的效果优于药对。结论:(1)中药虎杖、半枝莲、蝉蜕及其药对和小复方均具有一定体外抑制肺炎支原体的作用,且醇提物的效果优于水提物,小复方的效果优于单味药和药对,表明中药的抑菌作用与中药提取方法和药物的相互配伍产生的协同作用有关。(2)中药提取物对于MP感染后的A549细胞具有保护作用,不仅随着作用时间的推移保护作用逐渐增强。并且能降低感染后的A549细胞分泌的炎症因子TNF-α、IL-6、NF-κκB,呈量效关系,说明中药提取物对MP引起的炎症反应有调节作用。
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