高产谷胱甘肽酿酒酵母菌株的快速选育

来源 :2012氨基酸、有机酸产业发展论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nfx0123
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  谷胱甘肽,即γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酰-甘氨酸,是一种广泛存在于动植物和微生物细胞中的三肽,主要起抗氧化作用。谷胱甘肽在抗氧化、营养代谢、细胞内部调节(包括基因表达、DNA和蛋白合成、细胞繁殖和凋亡、信号转导、细胞因子和免疫反应)中有重要作用,广泛应用在药品、食品和化妆品中。本文建立了高产谷胱甘肽酿酒酵母菌株的快速选育方法:在化学诱变后加入一种荧光标记物,通过流式细胞仪根据胞内谷胱甘肽含量与荧光强度高低的关系进行快速筛分。该方法可以马上判断正向突变和负向突变,正向突变可以马上体现出来,如果没有正向突变出现,可以马上放弃筛选工作,如果出现明显正向突变,可以在几分钟内完成目的菌株的初次分筛。经过一次化学诱变,流式细胞仪初筛后,按照传统方法对各个单菌落进行划线分纯复筛,得到最好的突变菌株较出发菌株谷胱甘肽含量提高了30%。该方法比起传统菌株筛选,大大提高了效率。
其他文献
芽孢杆菌在高渗透压的条件下,易转化为感受态细胞.甘氨酸的加入有助电击时保护细胞膜.本文通过甘露醇山梨醇制造高渗透压,同时调整甘氨酸加入时期、细胞生长程度及电转电压的调整,建立了感受态细胞对质粒pWB980的高效电转化方法.当OD600为0.8时加入甘氨酸,培养至OD600为1.6时停止生长、转化时电压为2100V的时候,可以得到536个转化子,经鉴定均为阳性克隆子.而常规电转化的最高仅为20个转化
精氨酸脱亚氨基酶(Arginine deiminase,ADI),是ADI途径的关键酶,催化精氨酸水解为瓜氨酸和氨.研究表明,其在精氨酸缺陷型肿瘤的临床治疗方面具有显著疗效,是一种潜在的新型抗癌药物.此外,瓜氨酸具有清除自由基,抗氧化等多方面的生理功能,在医用检测,保健食品等方面有着广泛的应用前景.因此,提高ADI酶的催化效率与产量具有非常重要的意义。本文选取三种来源于不同生境的ADI酶,分别为腾
嘌呤阻抑蛋白(PurR)参与调控嘌呤操纵子转录的起始,由purR基因编码.PurR阻抑蛋白存在时可以和嘌呤操纵子上游特定序列结合导致嘌呤操纵子转录不能起始,降低B.subtils的生产嘌呤类产品的效率.本实验采用基因重组技术敲除了腺苷生产菌B.subtilis XGL的purR基因,构建了PurR蛋白缺陷株B.subtilis XGL△purR.首先,采用PCR的方法,以腺苷生产菌B.subtil
应用PCR技术于腺苷生产菌枯草芽孢杆菌XGL基因组上扩增出腺苷琥珀酸裂解酶基因purB,以大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的穿梭载体pBE43为基本骨架,构建了purB基因的重组表达质粒.腺苷琥珀酸裂解酶是催化合成嘌呤核苷酸起始合成与循环的唯一双功能酶,属于肌苷酸合成酶系.重组质粒经双酶切鉴定,在1500bp处出现目的条带,与预期结果相一致,并且测序结果同Genbank中的序列同源性达到100%,未发生任何
谷氨酸生产提取工艺一直是各厂家关注的生产环节,目前工艺中,谷氨酸变晶母液一般用来蒸发浓缩后水解,水解液与离交高流混合后进入等电系统.本文对谷氨酸变晶母液及味精精制过程产生的味精母液的生产利用进行改进,提出将卧螺分离的麸酸与发酵液混合后进行等电提取,提高发酵液酸含量、提高等电一次收率,同时提高变晶麸酸质量,降低了变晶麸酸洗水用量,降低变晶麸酸母液的水解量,从而降低硫酸单耗,提高变晶一次收率,对于提高
本文研究了伞枝犁头霉利用蔗糖以及丙酮酸生产α-酮戊二酸(α-KG)发酵条件的优化.伞枝犁头霉D1能利用多种碳源发酵产α-KG,其中发酵蔗糖或丙酮酸时产酸量较高.通过单因素优化实验得到利用蔗糖或丙酮酸为底物的发酵最适条件即最佳发酵培养基组成和最佳培养条件.在最适条件下培养84h,伞枝犁头霉利用蔗糖产α-酮戊二酸量最大达14.0g/L,产酸速率为0.17g/(L·h),对蔗糖的转化率为34.9%.另外
组氨酸的生物合成不仅受第一个关键酶的反馈抑制,还受到组氨酸途径酶的阻遏.谷氨酸棒杆菌,一种革兰氏阳性菌,广泛用于工业氨基酸的生产.谷氨酸棒杆菌的组氨酸合成途径的酶分列在两个转录单位,hisEG和hisDCB-orf1-orf2-hisHA-im pA-hisFI.谷氨酸棒杆菌的hisDCB-orf1-orf2-hisHA-impA-hisFI操纵子是受T盒弱化调控的.本研究中,用tac启动子替换了
本文简要介绍了阜丰集团从生产、环保一体化的原则出发,开发出了一整套卓有成效的清洁生产工程技术,实现了将原来传统的污染末端治理观念转变为产品源头全方位、生产全过程的污染控制,废物多级开发、综合利用与治理,实现了中水回用和热能利用,具有显著的环保和社会效益。采用新工艺后,谷氨酸生产过程中的物料、能源和水消耗大幅降低、产品品质提高,具有明显的直接和间接经济效益。
我国是世界上米糠资源最丰富的国家,对米糠的深度加工和高值化加工的研究具有主要意义;L-乳酸作为世界三大有机酸之一,在现实中有着广泛的应用.本研究以米糠为原料,采用同步糖化发酵方法制备乳酸,有利于实现米糠的高值化.通过米糠液化糖化实验和同步糖化发酵实验来确定米糠同步糖化发酵生产乳酸的适宜条件.当米糠浓度为250g/L、米糠水解糖液60g/L(葡萄糖)、糖化酶添加量为1.0μL/g米糠干基时,CaCO
产能分布柠檬酸环保历程70年代没有环保设施(79年全国总产量5831吨)80年代开始有环保想法,国家拨款项目93年代初出现"清洁生产"概念,90年代是柠檬酸环保的起步,是污水处理工艺百花齐放的年代少见城市污水处理厂/标排口,无在线监测
会议