应用原位末端标记法(TUNEL)分析猪繁殖与呼吸综合症病毒感染诱导宿主细胞凋亡

来源 :中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:laohe5201314
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利用原位末端标记(TdT-mediateddUTPnickandlabeling,TUNEL)方法检测猪繁殖与呼吸综合征(Porcinereproductiveandrespiratorysyndrome,PRRS)病毒感染仔猪后所产生的凋亡,8h即可检测到细胞凋亡,30h即发生明显的细胞凋亡,且凋亡细胞数目在感染第七天达到高峰,第七天以后逐渐减少,至感染后42天时仍能检测到少量凋亡细胞.PRRSV在体内可诱导肺、肺门淋巴结、肠系膜淋巴结、腹股沟淋巴结、扁桃体、脾脏、心脏、肝脏、胰脏、十二指肠、胸腺、肾脏、子宫、睾丸等组织的细胞发生凋亡.凋亡细胞多分布在肺泡和肺泡巨噬细胞以及肺泡中隔的单核细胞、淋巴结中巨噬细胞和单核细胞、其它组织中的单核巨噬细胞和上皮细胞.
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本研究根据PCV2的ORF2和PRRSV的ORF5序列分别设计了两对引物PL1/PL2和PN1/PN2进行多重PCR扩增,同时得到与实验设计相符的166bp和320bp特异扩增条带,表明多重PCR可以同时检测PRRSVDNA和PCVRNA.但PCV2引物对PCV模板扩增出现非目的条带,尚需对反应体系进行优化.
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