【摘 要】
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为了提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因核酸疫苗的免疫效力,根据已发表的鸡源C3d序列,设计并合成在5′端添加连接肽(Gly4Ser)2序列的C3d基因。用同尾酶Bgl Ⅱ和BamHⅠ构建含有3拷贝C3d与VP2的的重组表达质粒pcDNA-VP2-3C3d.用脂质体法转染BHK21细胞,48 h后,Western blot分析表明,表达的重组蛋白为162ku;间接免疫荧光试验检测转染细胞中
【机 构】
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江苏省农业科学院兽医研究所,农业部兽用生物制品工程技术重点实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京,210014;南京农业大学,动物医学院,江苏南京,210095
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会
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为了提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因核酸疫苗的免疫效力,根据已发表的鸡源C3d序列,设计并合成在5′端添加连接肽(Gly4Ser)2序列的C3d基因。用同尾酶Bgl Ⅱ和BamHⅠ构建含有3拷贝C3d与VP2的的重组表达质粒pcDNA-VP2-3C3d.用脂质体法转染BHK21细胞,48 h后,Western blot分析表明,表达的重组蛋白为162ku;间接免疫荧光试验检测转染细胞中具有特异性荧光。用重组表达质粒pcDNA-VP2-3C3d、与前期构建的真核表达质粒pcDNA-VP2免疫2周龄SPF鸡,二免14 d后,间接ELISA法检测IBDV抗体效价,pcDNA-VP2-3C3d组抗体水平显著高于pcDNA-VP2组,MTT法检测鸡脾淋巴细胞增殖活性,pcDNA-VP2-3C3d组免疫诱导的特异性淋巴细胞增殖活性显著高于pcDNA-VP2组(P＜0.05).本研究表明C3d可增强VP2基因免疫诱导的IBDV特异性体液和细胞免疫应答。
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作者在研究1998～2008年中国H9N2亚型禽流感病毒(AIV)分离株HA基因的进化时发现有2个致病性最强的毒株因HA基因第145位氨基酸的突变导致产生一个潜在的糖基化位点,从而使其不与单抗H6、F6等反应。为进一步探究这类变异毒株HA基因变异对H9亚型AIV的致病性的影响,本研究对12株具有上述血凝素分子特征的H9流行毒株进行了致病性方面的系统研究。结果显示这类毒株在HA裂解位点处仅有1个碱性
宁夏中卫市沙坡头区在六年时间里两次在蛋鸡群中发生高致病性禽流感(HPAI)疫情。通过流行病学调查、临床症状、病理变化和实验室诊断，指出此次沙坡头区鸡群HPAI疫情发生具有以下特点：发病无品种、饲养用途和年龄差别；具高抗体水平产蛋鸡群仍然发病；前期临床症状不显；发病鸡群死亡率高等。指出本次HPAI发生情况比较复杂，外部疫源的传入是引起疫情发生的根本因素，但养鸡户的一些行为习惯更需深刻反省。
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本研究设计构建了季节性流感H3亚型重组腺病毒疫苗。通过RT-PCR、间接免疫荧光、Western Blot等方法检测其抗原的转录和反应原性，以期为后续动物免疫实验奠定基础。
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