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【目的】rasH2转基因小鼠是由BALB/c小鼠和C57BL/6小鼠杂交所形成的F1代,在基因中转入了多份与细胞增殖相关的人源c-Ha-ras基因拷贝,对致癌物质具有很强的敏感性。rasH2小鼠短期致癌试验周期短、费用低,适用于遗传毒性和非遗传毒性的致癌物,使用范围较p53+/-转基因小鼠更广,假阳性与假阴性率低,预测准确率高,是目前国际上普遍接受的致癌试验替代模型之一。本文旨在对引进的rasH2转基因小鼠进行饲养与诱癌观察,在此基础上对国内某机构开发研制的临床拟用于治疗代谢综合征的新化合物TAX,采用rasH2转基因小鼠模型进行26周短期致癌试验研究,初步评价受试物TAX的潜在致癌毒性。【材料与方法】10周龄rasH2小鼠300只,体重18-22g,购自日本NOMURA JIMUSHO公司,随机分为7组,即空白对照组、阳性对照组、溶剂对照组及TAX30、60、120和240 mg/kg四个剂量组。其中空白对照组动物20只(雌、雄各半),不作任何处理;阳性对照组动物30只(雌、雄各半),在给药期第1、3和5天腹腔注射乌拉坦各1次,剂量为3.0 g/kg;其余各组每组动物各50只(雌、雄各半),其中溶剂对照组给予0.5%的羧甲基纤维素钠,TAX各剂量组给予如上剂量的TAX,每天灌胃给药1次,每周6天,连续给药6个月。给药结束后将动物安乐死并进行系统尸检,试验期间死亡动物尽快(死亡后不超过24 h)系统尸检,留取脑、脑下垂体、甲状腺和甲状旁腺、胸腺、肺、气管、心脏、唾液腺、肝、脾、肾、肾上腺、食道、胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠、膀胱、淋巴结、胰腺、睾丸/卵巢、附睾/子宫、雌性乳腺、皮肤、肌肉、外周神经、脊髓、胸骨和骨髓、股骨(及其关节)、眼和肿瘤组织等经中性缓冲福尔马林固定后,进行常规石蜡切片,HE染色,光镜检查,采用标准化术语对病变进行诊断。动物存活率采用存活函数Logrank分析程序比较,若各组间存活率无显著性差异,则对肿瘤发生率采用Cochran-Armitage进行趋势检验和fisher检验进行组间比较,显著性水准为单侧检验p<0.05。【结果】试验结束,空白对照组与阳性对照组雌性动物存活率分别为89%和0%,雄性动物分别为100%和0%,雌、雄动物两组间均有显著性差异(p<0.01)。溶剂对照组与低、中、高和最高剂量组雌性动物的存活率分别为92%、88%、100%、88%和92%,溶剂对照组与低、中、高和最高剂量组雄性动物的存活率分别为100%、88%、96%、92%和80%,各剂量组雌、雄动物与溶剂对照组均无显著性差异。显微镜检查揭示阳性对照组最常见的肿瘤为细支气管-肺泡腺瘤/腺癌(雌、雄动物的发生率均为100%,图1)和脾脏血管肉瘤(雌性为60%,雄性为80%),而空白对照组雌、雄动物细支气管-肺泡腺瘤/腺癌的发生率均为0%,脾脏血管肉瘤发生率雌性为11.1%,雄性为20%。两种肿瘤在阳性对照组与空白对照组雌、雄动物间均有显著性差异(p<0.01)。阳性对照组其他偶发的增生性病变包括肺脏血管瘤(仅雌性,6.7%),脾脏纤维肉瘤(雌、雄各6.7%),膀胱移行细胞癌(仅雄性,6.7%),前胃鳞状细胞癌(仅雄性,13.3%),卵巢血管瘤(6.7%)和甲状腺腺癌(仅雄性,6.7%)。上述肿瘤阳性对照组与空白对照组间均无显著性差异。TAX 30、60、120与240 mg/kg剂量组雄性小鼠肝腺瘤发生率分别为24%、44%、36%和44%(图2),其中60、120与240 mg/kg剂量组均显著高于溶剂对照组(8%)(p<0.01),溶剂对照组与TAX各剂量组雌性动物均未见肝腺瘤发生。TAX各剂量组未见其他致瘤效应。【讨论及结论】本试验空白对照组与尿烷阳性对照组动物存活率,以及肿瘤发生谱与发生率等,均与文献报道数据接近。TAX灌胃rasH2小鼠26周后,30-240 mg/kg剂量对小鼠生存率未见明显影响,60、120、240 mg/kg剂量下雄性小鼠肝腺瘤发生率明显上升,各剂量TAX对雌性小鼠肝腺瘤发生率无显著影响,30-240 mg/kg剂量下未见对肝脏以外脏器明显致瘤效应。