胁迫响应蛋白AflSkn7影响黄曲霉的形态发育和致病性

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黄曲霉是一种腐生的土壤真菌,能够污染收获前和收获后的作物。它产生的一种次级代谢产物——黄曲霉毒素,具有很强的毒性和致癌性,给人类健康带来潜在的威胁。Skn7(Suppressor of kre nine 7)是酵母中一个响应环境胁迫的调节蛋白,调节了酵母的多个生理过程。本研究利用同源重组技术构建了黄曲霉Skn7基因缺失突变体(ΔAfl Skn7)来揭示Afl Skn7对黄曲霉的形态发育以及致病性的影响。结果显示:ΔAfl Skn7的产孢能力比野生型的降低了5倍,产菌核能力完全丧失。与野生型相比,ΔAfl Skn7对细胞壁损伤试剂CFW和CR更为敏感,尤其是在含有CFW的培养基中,受抑制效果更明显。ΔAfl Skn7在3 mmol/L H2O2的条件下就表现出生长抑制,在6 mmol/L H2O2和0.01%t-BOOH条件下生长完全受到抑制,通过q RT-PCR试验发现ΔAfl Skn7中与氧化应激相关的基因(谷胱甘肽还原酶和超氧化物歧化酶)表达显著下调。在YES培养基和PDB培养基中,ΔAfl Skn7都不产生黄曲霉毒素,说明该基因能影响黄曲霉毒素的合成。侵染试验证明Afl Skn7缺失后在玉米上的生长、产孢、产毒的能力都显著下降。不过,我们发现Afl Skn7并不参与响应渗透胁迫。综上,本研究证实了Afl Skn7在黄曲霉的生长发育、产毒和侵染过程中发挥了重要的调控功能,为今后防止黄曲霉对农作物及食品的污染提供了一个新的解决思路。
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