随着抗体药物的广泛应用,对此类药物的品质管理工作的要求也越来越高。抗体药物属于蛋白质类药物,同小分子药物相比,抗体药物的质量控制更具挑战性。这是由于抗体药物较不稳定,易变性,易失活,也易为微生物污染、酶解破坏。工艺过程的微小变化也有可能导致药物变体产生。抗体药物变体包括:其降解产物、聚合物及各种翻译后修饰物等。目前国际上经常采用的抗体药物分析方法包括:SDS-PAGE电泳法、等电聚焦电泳法、高效液相色谱法等。近年来,针对抗体药物变体的分析,东曹公司推出系列抗体药物变体分析用色谱柱,包括:分子尺寸排阻色谱(SEC)柱—TSKgel SuperSW mAb HR,TSKgeISuperSW mAb HTP,TSKgel UItraSW Aggregate;离子交换色谱(IEC)柱—TSKgel CM-STAT,TSKgel SP-STAT;疏水相互作用色谱(HIC)柱—TSKgel Butyl NPR;反相色谱(RPC)柱—TSKgel Protein C4-300;正相色谱(NPC)柱—TSKgel Amide-80。这里采用TSKgeI系列抗体药物变体分析用色谱柱对各种抗体药物变体进行了分析。实验数据说明:高效液相色谱法(HPLC)可以对抗体药物以及重组蛋白等蛋白药物的不均一性进行有效的分析。多种色谱分析方法的有效组合,能够更好地进行蛋白药物的定量和定性分析。SEC法可以利用分子尺寸的不同,对多聚体、片段、PEG化蛋白等样品进行有效的分析。利用IEC法、HIC法、RPC法、正相色谱法(NPC/HILIC)可以对带电异构体、构造异构体、糖基化、脱酸胺化及氧化等变化引起的杂质进行高分辨率、高效分析。分离选择性取决于色谱分离模式、色谱柱的种类和色谱条件等。