目的:建立简单、快速和灵敏的UPLC-MS法用于测定癫痫患者体内丙戊酸血药浓度,并且比较所建立方法与荧光偏振免疫法（FPIA）和高效液相色谱法（HPLC）测定结果的相关性。方法:血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,采用EC-C₁₈色谱柱（2.7μm,4.6 mm×50 mm）进行分离,流动相为乙腈-水（45/55,v/v）等度洗脱,流速为0.6 mL/min。采用电喷雾离子源（ESI）,负离子模式,多反应监测扫描方式,丙戊酸和内标萘普生的解簇电压（DP）分别为-55,-50 V;碰撞能量（CE）分别为-5,-15 eV;用于定量分析的离子反应分别为m/z 143.0→143.0 （丙戊酸）和m/z 229.0→184.6 （萘普生）。收集规律服用丙戊酸制剂达稳态后的血清样本498例,分别用3种方法进行测定,考察3种测定方法的相关性和差异性。结果:丙戊酸在1-200μg/mL范围内线性关系良好,最低定量下限为1μg/mL。日内和日间精密度（RSD%）均低于5%,并且准确度在±7.92%范围内。低、中、高三个浓度的回收率分别为98.6±2.24%,97.9±1.64%和98.4±1.87%,基质效应和稳定性研究均符合生物样品测定要求。三种方法测定相关性良好,UPLC-MS法与FPIA法和HPLC法之间的相关系数为0.9894和0.9874,并且UPLC-MS法平均血药浓度较FPIA法低1.4μg/mL（95%CI:-7.7-4.9μg/mL）,UPLC-MS法较HPLC法高1.1μg/mL（95%CI:-5.7-7.9μg/mL）。结论:本方法简单,快速,高效,灵敏,测定结果与FPIA法和HPLC法有较好的相关性,可应用于丙戊酸血药浓度的常规监测。