【摘 要】
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利用抑制消减杂交技术构建鹅就巢与产蛋cDNA基因文库,旨在筛选就巢期母鹅卵巢组织内上调与下调表达的基因.以就巢期和产蛋期鹅卵巢组织互为实验子和驱动子,进行正反双向消减杂交,获得鹅卵巢差异表达基因文库.从双向文库随机挑选单菌落进行PCR验证,结果表明文库质量良好.选取654个阳性克隆进行测序分析,获得641条表达序列标签(ESTs).对ESTs进行去除载体序列、质量检测、聚类及拼接,经Blast比对
【机 构】
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中国农业科学院家禽研究所,扬州225003 江苏省苏州市乡韵太湖鹅有限公司,苏州215002
【出 处】
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第七届中国优质禽育种与生产研究会学术讨论会暨代表大会
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利用抑制消减杂交技术构建鹅就巢与产蛋cDNA基因文库,旨在筛选就巢期母鹅卵巢组织内上调与下调表达的基因.以就巢期和产蛋期鹅卵巢组织互为实验子和驱动子,进行正反双向消减杂交,获得鹅卵巢差异表达基因文库.从双向文库随机挑选单菌落进行PCR验证,结果表明文库质量良好.选取654个阳性克隆进行测序分析,获得641条表达序列标签(ESTs).对ESTs进行去除载体序列、质量检测、聚类及拼接,经Blast比对,有166条ESTs找到与之匹配的同源序列,其中92个是功能基因.比较就巢与产蛋SSH文库,发现就巢SSH库中参与细胞凋亡、信号转导及细胞结构的基因出现频率较高;产蛋特异性基因文库中参与物质能量代谢、细胞防御的基因较多;尚有许多差异片段属于未知功能蛋白或理论推定蛋白.结果提示,催乳素受体、抗苗勒管激素以及雌激素受体基因参与了鹅就巢行为调控.该结果为进一步研究鹅就巢行为分子调控机制奠定基础。
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为开展IFN-γ在贵妃鸡养殖中的抗病毒作用研究,进行贵妃鸡IFN-γ基因克隆与序列分析.根据GenBank中禽γ干扰素(Interferon,IFN-γ)cDNA序列设计引物,采用RT-PCR方法成功地从贵妃鸡脾脏淋巴细胞中扩增到IFN-γ基因,并将其克隆至pMD-18T载体中进行序列测定.结果表明,贵妃鸡IFN-γ基因全长495 bp,编码164个氨基酸,与红原鸡、绿头鸭、东北白鹅的核苷酸序列同
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